Eurycoma longifolia Jack. atau biasa dikenal sebagai Pasak Bumi sering digunakan sebagai obat tradisional karena berbagai macam kandungan metabolit sekundernya. Metabolit sekunder yang terkandung pada bagian tumbuhan dapat bervariasi karena adanya perbedaan dalam proses biosintesis. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menentukan kandungan fitokimia dari ekstrak etanol akar, batang, dan daun E. longifolia dengan skrining fitokimia dan KLT. Uji pendahuluan dilakukan dengan skrining fitokimia. Identifikasi metabolit sekunder dengan kromatografi lapis tipis dilakukan dengan menggunakan fase gerak n-heksan p.a : etil asetat p.a perbandingan 0:10; 2:8; dan 6:4dengan pereaksi spesifik. Hasil dari skrining fitokimia menunjukkan adanya kandungan senyawa seperti alkaloid, fenol, flavonoid, saponin, tanin, dan terpenoid steroid. Hasil identifikasi dengan kromatografi lapis tipis membuktikan adanya kandungan alkaloid, fenol, flavonoid, dan terpenoid steroid pada ekstrak E. longifolia. Berdasarkan penelitian ini dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol akar, batang, dan daun E. longifolia memiliki kandungan metabolit sekunder yang beragam.