Penelitian mengenai pengaruh perbedaan media tanam dan asal setek terhadap perkembangan perakaran dan keberhasilan pembibitan melati bertujuan untuk menganalisis interaksi yang terjadi antara media tanam dan asal setek, pengaruh media tanam, pengaruh asal setek, dan menganalisis interaksi, media tanam, serta asal setek yang terbaik terhadap perkembangan perakaran dan keberhasilan pembibitan melati.  Penelitian ini dilaksanakan di perkebunan melati milik bapak Ahmadi di Desa Jingah Habang Hilir Kecamatan Karang Intan Kabupaten Banjar Kalimantan Selatan pada bulan Maret sampai Juni 2020.  Penelitian ini menggunakan rancangan acak kelompok (RAK) dua faktor yang terdiri dari faktor pertama media tanam sebanyak 3 taraf yaitu m₀ = tanah 100% (kontrol), m₁ = tanah 75% dan arang sekam 25%, dan m₂ = tanah 75% dan cocopeat 25%.  Faktor kedua asal setek sebanyak 3 taraf yaitu b₁ = ujung batang, b₂ = tengah batang, dan b₃ = pangkal batang kemudian diulang sebanyak 3 kali sehingga diperoleh 27 satuan percobaan.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa terjadi interaksi antara media tanam dan asal setek terhadap perkembangan perakaran dan keberhasilan pembibitan melati pada peubah panjang akar yaitu dengan media tanah 75% + arang sekam 25% dan asal setek pangkal batang.  Secara mandiri pengaruh media tanam dengan menggunakan media tanah 75% dan cocopeat 25% memberikan pengaruh terbaik terhadap berat kering akar.  Asal setek ujung batang secara mendiri memberikan pengaruh terbaik terhadap persentase tumbuh.

Kata kunci : Pembibitan, Naungan, Setek, Media, Melati