Penyakit layu bakteri tersebut tergolong penyakit yang sulit dimusnahkan karena mampu bertahan hidup di tanah cukup lama dengan penyebaran yang cepat melalui air, peralatan pertanian dan lainnya. Sehingga diperlukan pengendalian hayati berupa penggunaan agens antagonis yang berasal dari rhizosfer tanaman. Penelitian bertujuan untuk mengetahui bakteri Bacillus sp. dan Pseudomonas berfluorescens dari rhizosfer bambu, rumput gajah dan putri malu memiliki kemampuan dalam menghambat bakteri R. solanacearum. Isolat pathogen ini diperoleh dari tanaman tomat yang bergejala layu bakteri diambil dari lahan Kelompok Tani di Karang Anyar dan rhizosfer bambu, rumput gajah dan putri malu diambil di daerah Palam, Guntung Manggis, Banjarbaru. Metode RAL dengan 7 perlakuan (4 ulangan). Perlakuan T₁ dan T₂ berbeda nyata dalam menimbulkan zona hambat terhadap R. solanacearum sebesar 1.15 mm dan 0.64375 mm. Kemampuan Pseudomonas berfluorescens dan Bacillus sp. dari rhizosfer yang berbeda memiliki kemampuan menghambat yang tidak sama dengan zona hambat terlihat samar atau tipis.