Dendrobium merupakan genus anggrek terbesar dari familia Orchidaceae dengan jumlah mencapai 1.450 spesies dan tersebar diseluruh dunia, terutamadi daerah hutan tropis dan subtropis. Namun, keberadaan anggrek alam, termasuk Dendrobium rentan terancam punah seperti D.lowii yang keberadaannya dialam sudah sangat jarang ditemukan. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis dan menentukan hubungan kekerabatan filogenetik anggrekDendrobium spp. asal Kalimantan Selatan berdasarkanpenanda DNA barcoding(matK). Sembilan belas sampel Dendrobium asal Kalimantan Selatan dan 1 Sampel Dendrobium asal Kalimantan Tengah berhasil dikoleksi akan dikarakterisasi secara molekuler dan analisis data. Dendrobium yang berasal dari Kalimantan Selatan memiliki keragaman genetik relatif tinggi (sebesar 0,016) dan mengelompok kedalam tujuh klad utama. Diagram divergensi memperlihatkan bahwa spesies yang memiliki kekerabatan paling dekat adalah D.stuartii 1 dengan D. tetrodon dan D.planibulbe ,juga D. jihoi dengan D. sanguinolentum. Sementara itu, spesies D. mantangai dengan D. pachyphyllum memiliki kekerabatan paling jauh dengan koefisien divergensi 0,061.Pada penelitian ini, penanda matK mampu membedakan Dendrobium hingga tingkat spesies.

Kata kunci:Dendrobium, DNA barcoding, Keragaman genetik, matK