Bermain game online terutama game kekerasan terus-menerus, dapat berdampak pada peningkatan reaktivitas kardiovaskular. Regulasi utama sistem kardiovaskular salah satunya diperankan oleh cabang sistem saraf otonom yaitu sistem saraf simpatis. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh game online terhadap aktivasi sistem saraf simpatis dengan parameter tekanan darah sistemik dan frekuensi denyut jantung. Metode penelitian ini yaitu pre-experimental dengan rancangan penelitian one group pretest-postest design. Sampel penelitian ini diambil menggunakan purposive sampling dan diperoleh sampel sebanyak 30 mahasiswa laki-laki. Pengukuran tekanan darah sistemik dan frekuensi denyut jantung dilakukan sebelum dan setelah prosedur bermain game online selama 30 menit. Data dianalisis menggunakan uji t berpasangan. Hasil analisis data adalah tidak terdapat perbedaan bermakna pada tekanan darah sistolik (p=0,67) dan diastolik (p=0,90), serta terdapat perbedaan bermakna pada pada frekuensi denyut jantung (p=0,03). Hasil penelitian ini menyimpulkan bahwa bermain game online selama 30 menit dapat meningkatkan frekuensi denyut jantung secara signifikan, tetapi tidak berpengaruh terhadap tekanan darah sistemik.