Diabetes Melitus (DM) telah menjadi permasalahan global dan termasuk ke dalam penyakit yang paling umum di dunia. Pengobatan menggunakan herbal merupakan salah satu solusi untuk mengatasi diabetes dan tumbuhan bungur (Lagerstroemia speciosa) merupakan herbal yang dapat mengatasi hal tersebut. Penelitian sebelumnya menyatakan L. speciosa mengandung berbagai metabolit sekunder yang dapat dimanfaatkan sebagai antidiabetes seperti, flavonoid, tanin dan alkaloid. Penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi adanya aktivitas antidiabetes dan menentukan dosis yang memiliki efek antidiabetes terbesar pada ekstrak etanol 96% L. speciosa secara in vivo menggunakan metode Tes Toleransi Glukosa Oral (TTGO). Optimasi dosis dilakukan untuk melihat pengaruh paling kuat setiap dosis menggunakan ekstrak etanol L. speciosa dengan dosis 25, 50, 75, 100, dan 125 mg/kgBB pada 1 mencit. Uji TTGO dilakukan pada 5 kelompok yang terdiri dari 5 mencit setiap kelompoknya. Mencit diambil darahnya pada menit ke-0 dan diberikan larutan uji sesuai kelompoknya, yaitu kontrol negatif (Na-CMC), kontrol positif (metformin), dan kelompok dosis terpilih (75 mg/kgBB, 100 mg/kgBB, dan 125 mg/kgBB). 30 menit kemudian diberikan larutan dekstrosa (D40) dan diambil darah mencit untuk diuji menggunakan GCU meter pada menit ke-10, 20, 30, 45, 60, 90, dan 120 setelah pemberian dekstrosa. Hasil menunjukkan adanya aktivitas antidiabetes pada ekstrak L. speciosa karena pada uji statistik One Sample T-Test menunjukkan perbedaan bermakna kenaikan glukosa darah pada menit ke-30 antara kelompok dosis dengan kontrol negatif (Sig. <0,05) dan tidak berbeda bermakna dengan kontrol positif (Sig. ≥0,05). Kelompok dosis 25 mg/kgBB memiliki efek antidiabetes terbesar karena pada menit ke-30 sudah menunjukkan adanya penurunan.