Ikan sepat rawa (Trichogaster trichopterus) merupakan ikan jenis perairan rawa yang jumlah produksinya sangat melimpah khususnya di Provinsi Kalimantan Selatan. Sebagai salah satu produk olahan dari ikan Sepat Rawa (Trichogaster trichopterus), tepung ikan Sepat Rawa (Trichogaster trichopterus) bisa menjadi salah satu sumber gizi bagi masyarakat. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh lama waktu pemasakan yang berbeda terhadap kadar lemak dan profil asam lemak tepung ikan sepat rawa (Trichogaster trichopterus) yang dihasilkan. Rancangan penelitian ini bersifat eksperimental dengan perlakuan lama waktu yang berbeda memberikan pengaruh yang berbeda terhadap kadar lemak dan profil asam lemak tepung ikan sepat rawa (Trichogaster trichopterus). Hasil penelitian menunjukkan bahwa perlakuan lama waktu pemasakan yang berbeda memberikan pengaruh yang sangat berbeda nyata terhadap kadar lemak tepung ikan sepat rawa (Trichogaster trichopterus). Kadar lemak terendah terdapat pada perlakuan B dengan menggunakan autoclave selama 20 menit sebesar 3,53 % dan untuk profil asam lemak terdapat 23 jenis asam lemak dengan asam terbanyak adalah asam palmitat dengan rata-rata setiap perlakuan sebesar 21,66%, asam oleat d sebesar 17,49% dan asam linoleat sebesar 6,69%.