Aktivitas hidup keseharian manusia tentu tidak pernah lepas dari penggunaan air salah satunya adalah Rumah Potong Hewan (RPH). Limbah cair yang dihasilkan oleh RPH diperkirakan cukup besar jumlahnya terutama saat hari besar keagamaan dan hari besar lainnya. Hasil analisis parameter awal Limbah Rumah Potong Hewan (RPH) Martapura didapatkan bahwa nilai BOD dan Fosfat sebesar 1366,67 mg/L dan 4,40 mg/L. Nilai ini melebihi baku mutu limbah bagi usaha dan/atau kegiatan rumah pemotongan hewan berdasarkan Permen LH No. 5 Tahun 2014. Pengolahan limbah cair yang kurang sempurna dapat memicu dampak kerusakan lingkungan serta kesehatan bagi masyarakat sekitar RPH oleh karena itu perlu dilakukan peningkatan kualitas air limbah keluaran RPH Martapura dengan menggunakan sistem Lahan Basah Buatan Aliran Horizontal Bawah Permukaan (LBB-AHBP). Sistem LBB-AHBP direkomendasikan karena metode ini pembuatannya membutuhkan biaya yang lebih murah jika dibandingkan dengan sistem pengolahan lain. Komponen penentu kinerja LBB yaitu desain, media, dan jenis tanaman. Selain jenis tanaman, biomassa tanaman juga akan mempengaruhi kinerja LBB. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui bagaimana pengaruh perbedaan variasi biomassa 700, 800, dan 1000 gram terhadap konsentrasi BOD dan Fosfat yang diteliti pada limbah cair rumah potong hewan dalam kurun waktu yang telah ditentukan. Penelitian menggunakan reaktor kayu berlapis plastik dengan dimensi 90 cm x 30 cm x 45 cm dengan jumlah 7 reaktor. Hasil penelitian menunjukkan bahwa dinamika penyisihan BOD dan Fosfat di effluent LBB-AHBP menggunakan tanaman Cyperus alternifolius dengan variasi biomassa pada limbah cair rumah potong hewan memiliki nilai konsentrasi BOD terendah yaitu sebesar 9,01 mg/L di hari ke-21 pada reaktor yang berisi 1000 gram Cyperus alternifolius dan nilai Fosfat terendah sebesar 0,01 mg/L di hari ke-7 pada reaktor yang berisi 800 gram Cyperus alternifolius.