Pemberian vaksin bivalen A. hydrophila dan E. tarda merupakan salah satu upaya dalam pencegahan dan penanggulangan serangan penyakit Motile Aeromonas Septicemia (MAS) dan Edwardsiellosis. Penelitian bertujuan untuk mengetahui pengaruh vaksin bivalen terhadap respons imun dan status kesehatan kesehatan lele dumbo serta mengetahui dosis optimal untuk vaksinasi. Vaksin bivalen dibuat dengan metode heat killed dan variasi dosis dilakukan dengan cara serial dilution 10⁹, 10⁸, 10⁷ dan 10⁶ sel/mL. Penelitian menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 5 perlakuan dan 3 ulangan. Parameter yang diamati meliputi titer antibodi, hematologis/profil darah, gejala klinis eksternal dan internal, histopatologis dan kualitas air. Hasil penelitian menunjukkan pemberian vaksin bivalen A. hydrophila dan E. tarda berpengaruh nyata terhadap titer antibodi dan mampu memicu pengaktifan respons imun spesifik pada ikan lele dumbo, tidak berpengaruh nyata pada status kesehatan lele dumbo yang dilihat dari penampang histopatologis dan hematologis, serta memberikan perlindungan dengan cara meminimalisir gejala klinis eksternal dan internal pada uji tantang. Kualitas air masih dalam kisaran normal untuk kehidupan dan vaksinasi ikan lele dumbo. Dosis vaksin bivalen A. hydrophila dan E. tarda yang terbaik pada penelitian adalah perlakuan A 10⁹ sel/mL, sedangkan berdasar hasil analisis regresi untuk dosis optimal diprediksi >10⁹ sel/mL.