Ikan patin merupakan salah satu ikan air tawar yang diminati oleh masyarakat Kalimantan Selatan. Ikan patin yang dibudidayakan masyarakat dapat terinfeksi oleh bakteri, salah satunya adalah Aeromonas hydrophila. Bakteri A. hydrophila adalah jenis bakteri yang bersifat patogen dan dapat mengakibatkan kematian ikan secara masal. Kematian ikan patin secara masal sudah pernah terjadi di daerah Bincau Kota Martapura dengan memperlihatkan ciri-ciri infeksi bakteri A. hydrophila diantaranya yaitu kulit ikan terluka dan bercak merah pada bagian tubuh ikan. Oleh karena itu perlu dilakukan identifikasi A. hydrophila. Tujuan dari penelitian ini untuk mengidentifikasi keberadaan Aeromonas hydrophila pada ikan patin di daerah Bincau Kota Martapura. Metode yang digunakan antara lain isolasi bakteri dari ikan patin, pemurnian koloni, uji biokimia (uji Gram, uji motilitas, uji oksidase, uji oksidatif-fermentatif, uji Rimmler-Shotts (RS) dan uji konfirmasi. Hasil penelitian pada isolasi bakteri menunjukkan adanya koloni bakteri berwarna krim yang diduga Aeromonas hydrophila (sampel A, B, C dan D) pada media BHIA dan dilakukan pemurnian pada koloni yang seragam (sampel A, B, C dan D), selanjutnya keempat sampel tersebut dilanjutkan uji biokimia. Uji Gram, uji motilitas, uji oksidase, uji oksidatif-fermentatif dan media selektif Rimler Shotts (RS) menunjukkan hasil positif pada sampel A dan B. Berdasarkan hasil uji biokimia dapat disimpulkan bahwa pada sampel A dan B teridentifikasi adanya bakteri Aeromonas hydrophila pada ikan patin di daerah Bincau Kota Martapura.
Kata Kunci: Ikan patin, Aeromonas Hydrophila, Brain Heart Infusion Agar (BHIA)