Penelitian ini bertujuan untuk mendeskripsikan kesesuaian, kelayakan, dan keterbacaan hasil Pengembangan E-Booklet Konsep Keanekaragaman Hayati Fase E SMAN 1 Pelaihari Berbasis Problem Based Learning. Penelitian ini merupakan penelitian dan pengembangan model 4D (Thiagarajan et al., 1974) yang dilakukan dalam 4 tahapan yaitu 1) Define, 2) Design, 3) Develop, dan 4) Disseminate. Tahap Disseminate dalam penelitian dilakukan terbatas hanya di sekolah uji dan publikasi artikel ilmiah. Teknik pengumpulan data menggunakan instrumen kesesuaian, kelayakan, dan keterbacaan. Subjek penelitian adalah 3 validator yang terdiri atas 2 orang dosen Pendidikan Biologi FKIP ULM dan 1 orang guru mitra Biologi SMAN 1 Pelaihari, serta 12 orang peserta didik fase E SMAN 1 Pelaihari. Hasil penelitian menunjukkan rata-rata kesesuaian sebesar 4,41 (sangat sesuai), rata-rata kelayakan sebesar 4,40 (sangat layak), dan rata-rata keterbacaan sebesar 4,43 (sangat baik). Hal ini menunjukkan bahwa E-Booklet yang dikembangkan sangat sesuai dengan tujuan pembelajaran, bahasa, format, dan media, sangat layak secara teknis digunakan sebagai variasi bahan ajar, dan sangat mudah untuk dibaca oleh peserta didik, sehingga dapat disimpulkan bahwa bahan ajar berbentuk E-Booklet yang dikembangkan bisa digunakan sebagai alternatif pengganti bahan ajar yang digunakan pada umumnya.

Kata kunci : E-Booklet, Pengembangan, Keanekaragaman hayati