Penyakit ikan yang paling sering menyerang pada ikan papuyu adalah penyakit bakterial. Salah satu jenis agen penyakit yang menyerang ikan papuyu adalah A. hydrophila yang dapat menyebabkan penyakit pada ikan, yaitu bercak merah atau disebut dengan motile aeromonad septicemia (MAS). Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis lama rendaman vaksin terbaik terhadap ikan papuyu setelah diinfeksi bakteri A. hydrophila. Penelitian ini memakai rancangan acak lengkap dengan 4 perlakuan dan 3 ulangan. Ikan papuyu direndamkan ke dalam rendaman vaksin A. hydrophila  dengan kepadatan vaksin A. hydrophila 10⁹sel/mL. Perlakuan A (30 menit), B (3 jam), C (6 jam) dan K (kontrol). Parameter yang diamati meliputi relative percent survival (RPS), rerata waktu kematian (RWK), mortalitas dan sintasan, kualitas air. Berdasarkan hasil yang diperoleh dari uji analisis keragaman (anova) menunjukkan bahwa lama perendaman vaksin A. hydrophila terhadap ikan papuyu yang telah diinfeksi bakteri A. hydrophila tidak berpengaruh nyata, maka H0 diterima, H1 ditolak. Waktu perendaman ikan dalam vaksin yang terbaik selama 3 jam. Kualitas air yang dipakai dalam penelitian ini masih dalam rentang yang sesuai dengan standar kebutuhan ikan hidup dan tidak mempengaruhi parameter penelitian yang lainnya.

Kata kunci : Aeromonas hydrophila, papuyu, waktu rendaman vaksin.