Penelitian ini bertujuan untuk mengkaji pengaruh pemberian hormon 2,4-D (auksin) dan BAP (sitokinin) terhadap pertumbuhan eksplan daun ramania (Bouea macrophylla Griffith.) melalui kultur in vitro. Eksperimen ini menggunakan lima perlakuan dengan variasi konsentrasi 2,4-D dan BAP, yang masing-masing diulang lima kali. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian zat pengatur tumbuh ini tidak menghasilkan pembentukan kalus yang berhasil dalam periode pengamatan 35 hari. Semua eksplan mengalami browning (pencoklatan) dan kontaminasi jamur, yang menunjukkan bahwa konsentrasi 2,4-D dan BAP dari 0,8 hingga 1,6 g tidak efektif untuk induksi kalus. Browning dan kontaminasi mikroba diidentifikasi sebagai hambatan utama. Temuan ini menekankan pentingnya mengoptimalkan konsentrasi hormon dan memperbaiki kondisi media untuk meningkatkan kelangsungan hidup eksplan dan meminimalkan kontaminasi pada penelitian di masa mendatang.