Pengukuran aktivitas antioksidan menggunakan satu panjang gelombang (1λ) dikenal cepat dan sederhana, namun rentan terhadap gangguan matriks dan faktor eksternal. Penelitian ini membandingkan dua cara pengukuran aktivitas antioksidan, yaitu cara 1λ dan tiga panjang gelombang (3λ), dengan menggunakan metode DPPH. Sampel yang digunakan meliputi minyak atsiri daun limau kuit hasil distilasi uap-air pada suhu uap kontrol 60–70 °C, serta dua senyawa standar, yaitu asam galat dan asam askorbat. Hasil uji linearitas menunjukkan bahwa cara 1λ memberikan linearitas yang lebih baik dalam hubungan antara konsentrasi dan absorbansi untuk asam galat, asam askorbat, dan minyak atsiri daun limau kuit, dengan nilai koefisien determinasi (R²) sebesar 0,9951; 0,9501; dan 0,9389. Sebaliknya, cara 3λ memiliki nilai R² sebesar 0,6403; 0,3669; dan 0,255. Nilai linearitas dari λ interval 20 nm juga diuji apakah sama baiknya dengan ? 516 nm (?maks), pada ? 496 nm nilai R2 diperoleh sebesar 0,597; 0,2128; 0,0045, dan pada ? 536 nm nilai R² sebesar 0,1333; 4187; 0,0078. Uji linearitas hubungan antara logaritme konsentrasi dan rerata inhibisi dalam penentuan IC?? pada cara 1λ hampir sama baiknya dengan cara 3λ, R² pada cara 1λ didapat sebesar 0,9917; 0,9495; dan 0,9658, cara 3λ memperoleh R² sebesar 0,958; 0,9269; dan 0,8331. Nilai aktivitas antioksidan (IC??) diperoleh dengan cara 1λ sebesar 95,059; 58,316; dan 658,020 µg/mL, sedangkan dengan cara 3λ dihasilkan nilai IC?? sebesar 11,391; 31,306; dan 140,535 µg/mL. Berdasarkan parameter linearitas yang telah diperoleh, cara 1λ dinilai lebih baik dan konsisten dalam pengukuran aktivitas antioksidan dibandingkan cara 3λ.

Kata Kunci: aktivitas antioksidan, DPPH, panjang gelombang, regresi linier, minyak atsiri, limau kuit, multi panjang gelombang