Dunia pendidikan sekarang dituntut untuk beradaptasi dengan perkembangan teknologi yang berkembang pesat. Media pembelajaran yang berbasis teknologi dan memuat contoh nyata di lingkungan sekitar, menarik serta interaktif dapat meningkatkan motivasi belajar dan pemahaman konsep keanekaragaman hayati sub materi jamur. Penelitian ini bertujuan untuk (1) mendeskripsikan keragaman jenis jamur makroskopis divisi Ascomycota di Taman Hutan Raya Sultan Adam Mandiangin, (2) mendeskripsikan kesesuaian media, (3) mendeskripsikan kelayakan media, (4) mendeskripsikan keterbacaan peserta didik terhadap media, (5) mendeskripsikan respon peserta didik terhadap media. Pengembangan flashcard berbasis augmented reality menggunakan model 4D oleh Thiagarajan sampai pada tahap Disseminate (penyebarluasan) secara terbatas. Subjek pada uji kesesuaian dan uji kelayakan dilakukan oleh 3 orang ahli, uji keterbacaan dan uji respon dilakukan oleh 15 peserta didik yang telah mempelajari materi keanekaragaman hayati. Berdasarkan hasil penelitian ditemukan 4 jenis jamur makroskopis divisi Ascomycota yaitu: Cookeina tricholoma, Cookeina speciosa, Xylaria sp., danXylaria polymorpha. Media flashcard berbasis augmented reality yang dikembangkan memperoleh skor rata-rata pada uji kesesuaian sebesar 4,42 (sangat sesuai), uji kelayakan sebesar 4,52 (sangat layak), uji keterbacaan sebesar 4,30 (sangat baik), dan uji respon peserta didik sebesar 4,35 (sangat baik). Hal ini menunjukkan bahwa media yang dikembangkan layak digunakan sebagai penunjang pembelajaran biologi pada konsep keanekaragaman hayati sub materi jamur.