Dendrobium merupakan salah satu genus anggrek dengan tingkat keragaman tinggi dan nilai konservasi yang signifikan, terutama di kawasan hutan tropis Kalimantan. Namun, berbagai aktivitas manusia seperti deforestasi, alih guna lahan, dan perubahan iklim telah mengancam kelestarian spesies-spesies anggrek ini di habitat aslinya. Untuk mendukung upaya pelestarian dan pemanfaatannya, diperlukan penelitian karakterisasi plasma nutfah secara molekuler guna mendapatkan data keragaman genetik dan pola kekerabatan antarspesies. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan tingkat keragaman genetik dan hubungan kekerabatan spesies anggrek Dendrobium dari Tahura Sultan Adam, Kalimantan Selatan, dengan memanfaatkan penanda molekuler trnL?F dari DNA kloroplas. Sebanyak 8 sampel anggrek dikoleksi dari kawasan konservasi, diisolasi DNA-nya, dan diamplifikasi dengan pasangan primer spesifik untuk daerah trnL?F. Fragmen DNA hasil amplifikasi kemudian di-sequencing dan dianalisis dengan perangkat lunak MEGA 12, termasuk proses penyejajaran (alignment), analisis pola mutasi, estimasi keragaman nukleotida, serta rekonstruksi filogenetik dengan metode Maximum Likelihood. Hasil penelitian menunjukkan bahwa nilai keragaman genetik anggrek Dendrobium yang dianalisis berada pada tingkat nukleotida sebesar 0,053, mengindikasikan tingkat variasi genetik yang sedang antar sampel. Analisis filogenetik memperlihatkan pola pengelompokan spesies menjadi beberapa klad yang sesuai dengan tingkat kedekatan genetik dan morfologi masing?masing sampel. Informasi ini dapat digunakan sebagai data dasar dalam pengelolaan plasma nutfah, perbaikan strategi konservasi, dan pengembangan pemuliaan anggrek Dendrobium, khususnya di kawasan konservasi anggrek Tahura Sultan Adam dan daerah lain di Kalimantan Selatan.

Kata kunci: anggrek dendrobium, trnL?F, keragaman genetik, konservasi, tahura