Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui keberagaman koloni jamur mikroskopis pada air laut serta untuk mengetahui validitas, keterbacaan dan respon peserta didik terhadap Electronic Handout ragam Marine Fungi. Penelitian diawali dengan penelitian deskriptif untuk mengetahui kebutuhan siswa dan guru. Riset dilakukan dengan pengambilan sampel air laut untuk kemudian ditanam pada medium biakan PDA. Data pertumbuhan koloni dijadikan bahan untuk dimuat dalam Electronic Handout yang dikembangkan. Pengembangan Electronic Handout menggunakan model 4-D. Rancangan Electronic Handout divalidasi oleh ahli materi dan ahli media. Jika Electronic Handout valid dan layak untuk digunakan, maka dilakukan uji keterbacaan pada kelompok kecil siswa untuk melihat keefektifan Electronic Handout yang dikembangkan, kemudian dilakukan implementasi pada kelas XI T.A 2024/2025 di SMAN 7 Banjarmasin. Berdasarkan hasil biakan jamur mikroskopis dari sampel air laut menunjukkan bahwa terdapat tiga koloni jamur. Hasil pengembangan Electronic Handout menunjukkan validitas materi sebesar 86,64 % (sangat valid) dan validasi media sebesar 97% (sangat valid) sehingga layak untuk digitalisasi, keterbacaan Electronic Handout sebesar 88,8% (sangat baik) dan respon peserta didik sebesar 89,16% (sangat menarik). Kesimpulannya, isolasi jamur mikroskopis dari sampel air laut berhasil memperoleh tiga koloni, serta Electronic Handout yang dikembangkan dinyatakan sangat valid, layak untuk didigitalisasi, mudah dibaca, dan mendapatkan respon positif dari peserta didik.

Kata Kunci: Electronic Handout, Koloni jamur mikroskopis, Marine fungi,  Model 4-D, Pengembangan