Penyakit layu Fusarium pada tanaman tomat (Solanum lycopersicum) merupakan salah satu kendala utama yang menyebabkan penurunan produksi tomat. Pengendalian penyakit ini umumnya masih bergantung pada penggunaan fungisida kimia yang dalam jangka panjang dapat menimbulkan dampak negatif terhadap lingkungan. Upaya pengendalian yang ramah lingkungan perlu dikembangkan melalui pemanfaatan agens hayati. Salah satu produk yang berpotensi digunakan adalah Protaderma, yaitu biofungisida berbasis Trichoderma sp. yang berfungsi menekan pertumbuhan patogen serta meningkatkan ketahanan tanaman. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efektivitas Protaderma dalam menghambat pertumbuhan Fusarium sp., menentukan dosis yang paling efektif, serta melihat pengaruhnya terhadap pertumbuhan tinggi tanaman tomat. Pengujian dilakukan secara in vitro dengan metode dual culture dan uji lapangan menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 6 perlakuan dan 3 ulangan. Perlakuan tersebut meliputi kontrol (tanpa Protaderma) serta aplikasi Protaderma dengan lima dosis berbeda, yaitu 5 g, 10 g, 15 g, 20 g, dan 25 g per tanaman. Hasil menunjukkan bahwa Protaderma mampu menghambat pertumbuhan Fusarium sp. sebesar 60,8%, menurunkan kejadian penyakit dari 55,6% menjadi 0% pada dosis 20 g dan 25 g, serta meningkatkan tinggi tanaman hingga rata-rata 59,78 cm pada dosis 25 g.