Tulang ikan tenggiri merupakan limbah hasil produksi amplang yang masih mengandung protein cukup tinggi dan berpotensi untuk dimanfaatkan sebagai bahan hidrolisis. Pemanfaatan limbah tulang ikan tenggiri melalui proses hidrolisis untuk mendapatkan protein hidrolisat yang lebih sederhana dan mudah diserap. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis pengaruh penggunaan enzim papain dan enzim bromelin terhadap kadar protein hidrolisat tulang ikan tenggiri. Penelitian ini merupakan penelitian pre-eksperimental. Perlakuan pada penelitian terdiri dari dua jenis enzim, yaitu enzim papain dan enzim bromelin, masing-masing diberikan konsentrasi yang berbeda (4%, 5%, 6%, 7%) dengan tiga kali pengulangan pada setiap konsentrasi. Kadar protein diukur dengan metode Kjeldahl. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kadar protein tertinggi pada papain terdapat pada konsentrasi 5% sebesar 4,258%, dan bromelin menghasilkan kadar tertinggi pada konsentrasi 5% sebesar 4,955%. Hasil penelitian secara umum, enzim bromelin menunjukkan hasil kadar protein hidrolisat yang lebih tinggi dibandingkan dengan enzim papain pada tiap konsentrasi. Uji hipotesis menggunakan one way ANOVA didapatkan nilai p = 0,945. Dapat disimpulkan enzim papain menghasilkan kadar protein hidrolisat dengan jumlah yang tidak lebih banyak daripada enzim bromelin dalam proses hidrolisis tulang ikan tenggiri.