Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun Acacia auriculiformis asal Tapin terhadap bakteri Staphylococcus aureus (Gram positif) dan Escherichiacoli (Gram negatif), serta menentukan nilai Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) dan Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM).

Penelitian dilakukan menggunakan metode eksperimental dengan uji difusi cakram pada konsentrasi ekstrak 30%, 40%, dan 50%, menggunakan kloramfenikol 0,1% sebagai kontrol positif dan aquadest sebagai kontrol negatif. Penentuan KHM dilakukan dengan metode dilusi tabung, sedangkan KBM ditentukan menggunakan metode gores (streak plate). Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol

daun A. auriculiformis memiliki aktivitas antibakteri yang kuat terhadap S. aureus, dengan zona hambat masing-masing sebesar 15,50 mm; 16,71 mm; dan 17,69 mm. Sebaliknya, pada bakteri E. coli tidak terbentuk zona hambat pada seluruh konsentrasi uji (0 mm) dengan metode difusi cakram. Meskipun demikian, hasil uji KHM dan KBM menunjukkan bahwa ekstrak tetap mampu menghambat (KHM = 3,75%) dan membunuh (KBM = 3,75%) E. coli, yang mengindikasikan bahwa aktivitas antibakteri terhadap bakteri Gram negatif lebih terlihat pada metode yang melibatkan kontak langsung antara ekstrak dan bakteri. Nilai KHM dan KBM terhadap S. aureus berada pada konsentrasi <0,234375%, menunjukkan sensitivitas

yang sangat tinggi. Perbedaan efektivitas antara kedua jenis bakteri ini disebabkan oleh perbedaan struktur dinding sel, di mana bakteri Gram negatif memiliki lapisan

membran luar yang lebih kompleks sehingga menghambat difusi senyawa aktif. Dengan demikian, daun A. auriculiformis berpotensi dikembangkan sebagai

antibakteri alami, terutama terhadap bakteri Gram positif.

Kata kunci: Acacia auriculiformis, antibakteri, zona hambat, KHM, KBM, Staphylococcus aureus, Escherichia coli.