Kalangkala merupakan tumbuhan endemik yang banyak dijumpai di Kalimantan dan berpotensi dikembangkan sebagai sumber obat berbasis bahan alam, termasuk untuk terapi kanker. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis profil senyawa metabolit sekunder berpotensi antikanker dari fraksi etil asetat ekstrak metanol daun kalangkala asal Kalimantan Selatan serta mengevaluasi aktivitas antioksidan dan antikankernya. Simplisia (kadar air 0,5%) diekstraksi maserasi (n-heksana, metilen klorida, etil asetat, metanol). Ekstrak metanol difraksinasi menggunakan KCV. Selanjutnya, dilakukan penetapan kadar flavonoid (TFC) metode kolorimeter AlCl₃ dan fenolat total (TPC) metode Folin-Ciocalteu, uji antioksidan (DPPH dan ABTS), uji toksisitas BSLT, dan uji antiproliferasi terhadap sel CV-1 dan MCF-7 menggunakan metode resazurin. Profil senyawa pada FD-Ea dianalisis dengan UHPLC-HRMS. KCV menghasilkan FD-Hx (0,52 g), FD-Mc (26,88 g), FD-Ea (22,24 g), dan FD-MeOH (57,80 g). Hasil penelitian menunjukkan bahwa kadar TFC tertinggi dicapai D-Mc (73,555±2.889 mg QE/g ekstrak), dengan TPC D-MeOH 0,0237 mg GAE/g ekstrak. Aktivitas antioksidan terkuat pada uji DPPH dimiliki oleh D-Ea (IC?? 309,629±165,293 μg/mL), sementara D-MeOH unggul pada uji ABTS (IC?? 47,144±0,204 μg/mL). Ekstrak metanol menunjukkan toksisitas rendah dan aktivitas antiproliferasi selektif terhadap sel MCF-7 (IC?? 367,00 μg/mL) dibandingkan sel normal CV-1 (822,10 µg/mL) dengan SI sebesar 2,24. Analisis LC-HRMS mengidentifikasi senyawa dominan, seperti zingerol yang dilaporkan memiliki aktivitas antioksidan dan potensi antikanker. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa daun kalangkala berpotensi sebagai sumber kandidat senyawa antikanker berbasis bahan alam.