Biji kopi merupakan salah satu contoh bahan alam dari tumbuhan yang kaya akan senyawa antioksidan alami, terutama flavonoid. Penelitian mengenai biji kopi telah banyak dilakukan pada jenis arabika dan robusta, sedangkan biji kopi liberika masih relatif terbatas, khususnya dari Kalimantan Selatan. Tujuan dari penelitian ini untuk melakukan skrining fitokimia, menetapkan kadar flavonoid total, serta menguji aktivitas antioksidan pada biji kopi liberika dari beberapa daerah di Kalimantan Selatan. Sampel yang digunakan adalah biji kopi yang berasal dari Banjarbaru, Hulu Sungai Tengah, dan Tanah Laut. Skrining fitokimia dilakukan menggunakan uji tabung, penetapan kadar flavonoid total menggunakan metode kolorimetri AlCl₃, sedangkan aktivitas antioksidan diuji menggunakan metode ABTS berdasarkan nilai IC₅₀. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol 96% biji kopi liberika asal Banjarbaru, Hulu Sungai Tengah, dan Tanah Laut positif mengandung alkaloid, fenolik, flavonoid, saponin, dan triterpenoid. Kadar flavonoid total berturut-turut sebesar 28,4655; 37,1264; dan 32,2471 mg EK/g. Aktivitas antioksidan seluruh ekstrak tergolong sangat aktif dengan nilai IC₅₀ berturut-turut sebesar 46,9399; 39,5897; dan 41,9145 ppm.Analisis korelasi menghasilkan nilai koefisien korelasi sebesar -0,956 yang menunjukkan adanya korelasi negatif sangat kuat antara kadar flavonoid total dengan nilai IC₅₀, sehingga semakin tinggi kadar flavonoid total maka semakin rendah nilai IC₅₀ atau semakin kuat aktivitas antioksidannya.