Tanaman akasia (Acacia sp.) merupakan salah satu sumber bahan alam yang berpotensi sebagai antioksidan alami. Penelitian ini dilakukan untuk mengevaluasi profil fitokimia dan aktivitas antioksidan ekstrak etanol 96% daun acacia auriculiformis dan acacia mangium yang tumbuh pada kondisi lingkungan berbeda, yaitu lahan basah di Kabupaten Barito Kuala dan lahan kering di Kabupaten Tapin. Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 96%. Identifikasi golongan senyawa metabolit sekunder dilakukan melalui skrining fitokimia kualitatif, dan aktivitas antioksidan ditentukan menggunakan metode peredaman radikal bebas DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) melalui parameter IC50 yang diukur menggunakan spektrofotometri UV-Vis. Hasil skrining fitokimia menunjukkan bahwa kedua spesies daun akasia dari kedua wilayah asal mengandung senyawa fenol, flavonoid, tanin, steroid, dan saponin, sementara alkaloid memberikan hasil negatif pada seluruh sampel. Hasil pengujian aktivitas antioksidan menunjukkan bahwa ekstrak daun A. auriculiformis memiliki aktivitas antioksidan sangat kuat dengan nilai IC?? sebesar 48,827 ± 0,2510 ppm untuk sampel asal Tapin dan 45,016 ± 0,8248 ppm untuk sampel asal Barito Kuala. Sementara itu, ekstrak daun A. mangium menunjukkan aktivitas antioksidan kuat dengan nilai IC?? sebesar 58,3190 ± 0,9907 ppm untuk sampel asal Tapin dan 85,0892 ± 0,7152 ppm untuk sampel asal Barito Kuala. Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol 96% daun A. auriculiformis dan A. mangium asal Batola dan Tapin mengandung metabolit sekunder berupa fenol, flavonoid, tanin, steroid, dan saponin serta memiliki aktivitas antioksidan dengan kategori sangat kuat (A. auriculiformis) dan kuat (A. mangium) berdasarkan nilai IC50.
Kata kunci: Acacia auriculiformis, Acacia mangium, Antioksidan, DPPH, IC50.