Tanaman seledri (Apium graveolens L.) rentan terhadap serangan nematoda puru akar (Meloidogyne spp.) yang dapat menyebabkan kehilangan hasil hingga 70%. Pengendalian hayati menggunakan cendawan antagonis Gliocladium sp. menjadi alternatif yang ramah lingkungan dibandingkan nematisida sintetik. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efektivitas beberapa konsentrasi Gliocladium sp. dalam menekan Meloidogyne spp. dan pengaruhnya terhadap pertumbuhan tanaman seledri. Penelitian menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 4 perlakuan dan 5 ulangan. Perlakuan terdiri atas: PK (kontrol), PA (10? spora/10 mL), PB (10? spora/10 mL), dan PC (10? spora/10 mL). Variabel yang diamati meliputi intensitas serangan puru akar (IS), jumlah tangkai daun (JTD), dan berat segar daun (BSD). Hasil penelitian menunjukkan bahwa aplikasi Gliocladium sp. berpengaruh sangat nyata terhadap seluruh variabel yang diamati. Perlakuan PC memberikan hasil terbaik dengan intensitas serangan terendah sebesar 6,67%, menurunkan serangan hingga 86,84% dibandingkan kontrol (50,67%), serta meningkatkan jumlah tangkai daun menjadi 20,47 dan berat segar daun menjadi 10,93 gram. Semakin tinggi kerapatan spora Gliocladium sp. yang diaplikasikan, semakin efektif penekanan terhadap nematoda puru akar dan semakin baik pertumbuhan tanaman seledri.