Latar Belakang: Masyarakat Kalimantan Selatan memiliki tingkat kerusakan gigi yang sangat tinggi. Tingginya kerusakan gigi di Kalimantan Selatan salah satunya disebabkan oleh faktor lingkungan yaitu sumber air yang berasal dari lahan rawa gambut. Air gambut yang memiliki pH asam mampu membuat gigi terdemineralisasi atau lepasnya kandungan mineral-mineral pada gigi. Salah satu kandungan mineral yang dapat terdemineralisasi oleh air gambut adalah ion tembaga (Cu²⁺) dan ion selenium (Se⁴⁺). Lepasnya kandungan mineral-mineral pada gigi membuat enamel gigi secara perlahan larut sehingga gigi lebih mudah terkena karies. Tujuan: Untuk menganalisis pengaruh perendaman gigi pada air gambut terhadap pelepasan ion tembaga dan selenium. Metode: Penelitian ini menggunakan metode eksperimental laboratorik dengan jumlah spesimen 18 buah gigi premolar rahang atas manusia yang sudah diekstraksi. Dibagi dalam 2 kelompok perlakuan yaitu perendaman dalam air PDAM dan air gambut, serta 1 kelompok kontrol yaitu perendaman dalam saliva buatan. Perendaman gigi dilakukan selama 7 hari. Pengukuran kadar pelepasan ion tembaga dan ion selenium menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Data diuji statistik menggunakan One Way ANOVA. Hasil: Rerata pelepasan ion tembaga pada saliva buatan (3,8 ± 0,51 ppm), air PDAM (3,72 ± 1,02 ppm) dan air gambut (3,37 ± 0,97 ppm) menunjukkan tidak terdapat perbedaan bermakna antara seluruh kelompok perendaman. Rerata pelepasan ion selenium pada saliva buatan (7,61  ± 2,34 ppm), air PDAM (2,4 ± 0,62 ppm) dan air gambut (0,85 ± 0,38 ppm) menunjukkan terdapat perbedaan bermakna antara seluruh kelompok perendaman, selanjutnya dilakukan uji lanjutan menggunakan Post hoc Dunnett’s T3 yang menunjukkan nilai p=0,000 (p<0,05). Kesimpulan: Tidak terdapat pengaruh perendaman gigi dalam air gambut terhadap pelepasan ion tembaga namun terdapat pengaruh pada pelepasan ion selenium.