Lebah kelulut (Heterotrigona itama) merupakan lebah tanpa sengat yang banyak dibudidayakan melalui kegiatan meliponikultur. Kondisi lingkungan dan ketersediaan vegetasi di sekitar koloni dapat membentuk karakteristik habitat yang berbeda pada setiap lokasi. Penelitian ini bertujuan mengidentifikasi karakteristik habitat koloni heterotrigona itama pada tiga lokasi meliponikultur di Kota Banjarbaru, meliputi kondisi mikroklimat, vegetasi sumber pakan, dan organisme pengganggu, serta membandingkan kondisi lingkungan antarlokasi. Penelitian dilakukan pada lokasi Habe garden, Roemah lebah, dan Asyifa. Parameter mikroklimat yang diamati meliputi suhu udara, kelembapan udara, dan intensitas cahaya, sedangkan vegetasi sumber pakan dan organisme pengganggu dianalisis secara deskriptif. Perbedaan mikroklimat dianalisis menggunakan One-Way Analysis of Variance (ANOVA) dan dilanjutkan dengan uji Least Significant Difference (LSD) pada parameter yang berbeda nyata. Hasil penelitian menunjukkan bahwa vegetasi sumber pakan terdiri atas 25 jenis di Habe garden, 19 jenis di Roemah lebah, dan 12 jenis di Asyifa. Suhu udara tidak berbeda nyata antarlokasi, sedangkan kelembapan udara dan intensitas cahaya menunjukkan perbedaan nyata. Komposisi vegetasi dan organisme pengganggu juga menunjukkan variasi antarlokasi. Perbedaan tersebut menunjukkan bahwa karakteristik habitat Heterotrigona itama pada ketiga lokasi terbentuk dari kombinasi kondisi mikroklimat, vegetasi sumber pakan, dan organisme pengganggu yang berbeda.

Kata kunci: kelulut, mikroklimat, organisme, pakan, vegetasi