Healthcare-associated infections (HAIs) merupakaninfeksi yang terjadi pada pasien yang sedang menjalani perawatan di rumah sakit selama 48 jam. HAIs menjadi salah satu penyebab utama morbiditas dan mortalitas.Salah satu jenis HAIs yang sering dijumpai  adalah infeksi daerah operasi (IDO). Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) merupakan penyebab umum HAIs dan IDO. Penggunaan handrub di rumah sakit oleh tenaga kesehatan merupakan cara untuk mencegah HAIs. Kontaminasi antiseptik dapat meningkatkan risiko  pasien di IGD dan ruang rawat bedah terutama oleh bakteri MRSA. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui persentase kontaminasi MRSA dalam handrub berbasis alkoholyang digunakan di IGD dan ruang rawat bedah RSUD Ulin Banjarmasin. Isolasi bakteri dilakukan dengan metode In-Use Test kemudian dilakukan indentifikasi secara konvensional dan uji antibiotik cefoxitin. Hasil penelitian dari 15 sampel handrub yang diambil di IGD dan ruang rawat bedah ditemukan 11 botol handrub (73,33%)terkontaminasi. Kesimpulan identifikasi bakteri pada penelitian ini tidak ditemukan bakteri MRSA.