Ikan sepat rawa (Trichogaster trichopterus) adalah jenis ikan perairan rawa yang banyak ditemukan di Perairan Kalimantan Selatan. Tepung ikan sepat rawa (Trichogaster trichopterus) merupakan sumber protein hewani yang mana komponen utama penyusun proteinnya adalah asam amino. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh yang terjadi pada tepung ikan sepat rawa yang diolah menerapkan metode pemasakan dengan lama waktu yang berbeda. Rancangan penelitian ini bersifat eksperimental dengan perlakuan lama waktu pemasakan yang berbeda terhadap kadar protein dan profil asam amino tepung ikan sepat rawa. Hasil penelitian menunjukkan bahwa perlakuan lama waktu pemasakan yang berbeda memberikan pengaruh yang berbeda nyata terhadap kadar protein dan profil asam amino tepung ikan sepat rawa berdasarkan hasil Analysis of Variance (ANOVA) α 5%. Kesimpulan dari penelitian ini adalah pengolahan tepung ikan sepat rawa dengan lama waktu pemasakan yang berbeda berpengaruh terhadap kadar protein dan profil asam amino tepung ikan sepat rawa yaitu kadar protein tertinggi pada perlakuan C sebesar 63,76% dan total asam amino tertinggi pada perlakuan B yaitu sebesar 68,46%.