Universal precaution merupakan salah satu tindakan pengendalian infeksi yang dilakukan oleh seluruh tenaga kesehatan termasuk perawat guna mengurangi risiko penyebaran infeksi. Faktor usia dan pendidikan memegang peranan penting dalam menambah pengetahuan tentang universal precaution, semakin sering mendapatkan informasi dan pengalaman praktik terkait pelaksanaan universal precaution, maka pengetahuannya akan semakin bertambah pula dan adanya kepedulian dalam menerapkan universal precaution. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui tingkat pengetahuan perawat tentang universal precaution di RSUD Ratu Zalecha Martapura. Penelitian ini menggunakan metode diskriptif kuantitatif dengan pendekatan cross sectional dan menggunakan teknik stratified random sampling. Sampel pada penelitian ini berjumlah 87 perawat di ruang rawat inap RSUD Ratu Zalecha Martapura. Instrumen yang digunakan berupa kuesioner pengetahuan perawat tentang universal precaution. Hasil penelitian ini menunjukkan pengetahuan perawat tentang universal precaution hampir seluruh responden berada pada kategori tingkat pengetahuan baik dengan total 81 (93,1%), sedangkan untuk responden dengan tingkat pengetahuan sedang yaitu dengan total 6 (6,9%), dan tidak seorangpun dari responden yang memiliki pengetahuan dengan kategori kurang. Hal ini menunjukkan bahwa pengetahuan perawat yang baik tentang universal precaution memiliki pengaruh dalam tindakan pengendalian infeksi di rumah sakit. Seorang perawat disarankan dapat meningkatkan dan mempertahankan pengetahuannya dalam melaksanakan universal precaution guna mencegah risiko penyebaran infeksi.

Kata kunci :  pengetahuan, perawat, universal precaution.