Mahalabiu merupakan sastra lisan yang berkembang di daerah Kalimantan Selatan. Dalam praktiknya, mahalabiu tidak melibatkan penggunaan tulisan sehingga penyebarannya disampaikan secara turun-temurun melalui lisan, dari satu generasi ke generasi berikutnya. Bahasa mahalabiu terdiri dari kalimat yang bermakna ganda atau ambiguitas. Tujuan penelitian ini ialah untuk mendeskripsikan struktur, fungsi, dan makna wacana humor video mahalabiu di Instagram Gazali Rumi. Penelitian ini merupakan jenis penelitian kualitatif yang menggunakan metode deskriptif. Teknik pengumpulan data yang digunakan ialah teknik simak dan catat. Peneliti menggunakan delapan belas episode video sebagai sumber data penelitian. Data yang digunakan berupa kata, frasa, klausa, dan kalimat dari video mahalabiu di Instagram Gazali Rumi. Hasil penelitian ini sebagai berikut. Pertama, struktur mahalabiu terdiri atas pengantar dan deskripsi, tetapi ada yang hanya terdiri dari deskripsi. Kedua, fungsi mahalabiu ada empat, yaitu: (1) sarana pengantar percakapan; (2) sarana mendidik; (3) sarana bergurau atau bercanda; dan (4) sarana memperbaiki akhlak atau moral. Ketiga, makna mahalabiu dalam video Instagram Gazali Rumi memiliki perbedaan antara penutur dan lawan tutur. Perbedaan tersebut disebabkan oleh hubungan antarmakna pada suatu kata atau frasa, seperti homonim, homofon, dan polisemi. Selain itu, perbedaan makna juga disebabkan oleh faktor ketaksaan, seperti pengurangan frasa, dan komentar yang tidak sesuai dengan topik. Bagi peneliti selanjutnya yang memilih topik mahalabiu, disarankan untuk membahas dampak negatif gaya humor mahalabiu di media sosial.