Kontaminasi bakteri Escherichia coli dapat terjadi ketika tangan kontak dengan bagian tubuh yang mengandung mikroba kemudian menyentuh bahan dan peralatan. Kontaminasi bakteri E.coli pada jajanan dapat menyebabkan diare bagi manusia terutama anak sekolah dasar yang merupakan rawan terkena penyakit, salah satunya penyaki diare. Berdasarkan laporan penyakit diare Puskesmas Martapura 1 tahun 2023 terdapat 247 kasus anak-anak yang terkena diare. Penelitian bertujuanuntuk menjelaskan adanya hubungan personal higiene, penyediaan air bersih, bahan, dan peralatan pedagang dengan kontaminasi bakteri Escherichia coli pada jajanan anak sekolah dasar wilayah kerja Puskesmas Martapura 1. Jenis penelitian yaitu observasional analitik dengan desain cross sectional dengan teknik propotional sampling. Populasi penelitian ini adalah seluruh pedagang jajanan anak sekolah dasar wilayah kerja Puskesmas Martapura 1, dengan sampel 45 responden. Instrumen berupa lembar observasi dan lembar hasil pemeriksaan kontaminasi bakteri Escherichia coli. Analisis data bivariat menggunakan uji chi-square. Berdasarkan hasil penelitian variabel personal higiene (p-value= 0,022), penyediaan air bersih (p-value= 0,042), bahan jajanan (p-value= 0,028), dan peralatan pedagang (p-value= 0,042) berhubungan dengan kontaminasi bakteri Escherichia coli. Kesimpulan penelitian ini terdapat hubungan antara personal higiene, penyediaan air bersih, bahan jajanan dan peralatan pedagang dengan kontaminasi bakteri Escherichia coli pada jajanan minuman anak sekolah dasar wilayah kerja Puskesmas Martapura 1.