Keanekaragaman hayati (biodiversity) adalah keragaman kehidupan di bumi yang meliputi bakteri, jamur, tumbuhan dan hewan, yang seluruhnya membentuk ekosistem dan dapat dilihat pada berbagai tingkatan, mulai dari keragaman genetik, spesies (jenis) dan ekosistem. Konsep tersebut dikembangkan melalui e-handout berbasis flipbook. Penelitian ini bertujuan untuk mendeskripsikan kesesuaian, kelayakan dan keterbacaan peserta didik terhadap hasil Pengembangan E-handout Konsep Keanekaragaman Hayati berbasis Flipbook. Penelitian pengembangan (Research and Development) menggunakan model 4D (Thiagarajan et al., 1974). Proses pengembangan dilakukan dengan 4 langkah yang terdiri atas; (1) Define (Pendefinisian), (2) Design (Perancangan), (3) Develop (Pengembangan), dan Disseminate (Penyebaran) yang dilakukan secara terbatas di sekolah uji dan publikasi artikel. Teknik pengumpulan data menggunakan instrumen kesesuaian dan kelayakan. Subjek penelitian adalah 3 orang ahli dan 9 peserta didik XI-2 SMAN 4 Banjarmasin. Hasil pengujian kesesuaian pengembangan e-handout Konsep Keanekaragaman Hayati menunjukkan sangat sangat sesuai dengan skor 4,37. Hal ini berarti e-handout sangat sesuai dengan alur tujuan pembelajaran yang ada saat ini. Kelayakan berkategori sangat layak dengan skor 4,51. Hal ini berarti e-handout sangat layak digunakan sebagai salah satu sumber belajar peserta didik. Hasil keterbacaan yang diisi oleh 9 peserta didik mendapatkan hasil baik dengan skor 4,10. Hal ini berarti e-handout mudah dibaca dan dipahami oleh peserta didik.

Kata Kunci: E-handout, Keanekaragaman Hayati, Flipbook, 4D