Ikan Adungan (Hampala macrolepidota), spesies air tawar asli Indonesia, kaya akan protein dan berpotensi digunakan sebagai bahan pangan fungsional. Salah satu aplikasinya adalah hidrolisis untuk menghasilkan peptida bioaktif dengan sifat antibakteri. Tujuan studi ini adalah untuk menyelidiki aktivitas antibakteri terhadap Escherichia coli pada hidrolisat protein ikan Adungan menggunakan enzim bromelain pada konsentrasi 6% dan 7%. Hidrolisis dilakukan pada suhu 55 °C selama enam jam, diikuti dengan inaktivasi enzim dan sentrifugasi. Parameter yang diamati meliputi hasil, derajat hidrolisis, dan zona penghambatan antibakteri. Hasil menunjukkan bahwa konsentrasi 6% menghasilkan hasil tertinggi (37,96%) dan derajat hidrolisis tertinggi (67,73%). Aktivitas antibakteri tertinggi diamati pada konsentrasi 7%, yang memiliki zona inhibisi rata-rata 10,72 mm (sekitar 11 mm, yang termasuk dalam kategori kuat). Analisis ANOVA menunjukkan perbedaan yang signifikan antara perlakuan (p < 0,05). Hasil ini menyarankan bahwa konsentrasi enzim mempengaruhi karakteristik hidrolisat dan efektivitas antibakterinya.

Kata kunci: Ikan Adungan, Enzim Bromelin, Hidrolisat Protein, Escherichia coli, Antibakteri.