Penyakit kardiovaskular merupakan penyebab kematian utama yang salah satunya dapat disebabkan oleh pembentukan bekuan darah (trombus). Penelitian ini bertujuan untuk menguji aktivitas anti pembekuan darah dari ekstrak etanol daun kalangkala (Litsea garciae) secara in vitro dan in vivo. Uji in vitro dilakukan melalui pengamatan waktu pembekuan darah serta pemeriksaan morfologi darah secara mikroskopis, sedangkan uji in vivo dilakukan menggunakan metode waktu perdarahan pada mencit. Konsentrasi ekstrak yang digunakan adalah 2%, 4%, dan 6% untuk uji in vitro, serta 62,5; 125; dan 250 mg/KgBB untuk uji in vivo. Hasil menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun kalangkala mengandung flavonoid total sebesar 8,336 mgEK/g. Uji aktivitas menunjukkan bahwa ekstrak konsentrasi 6% dapat menghambat pembekuan darah, sedangkan dosis 125 mg/KgBB secara signifikan memperpanjang waktu perdarahan (p > 0,05) dibandingkan kontrol positif. Berdasarkan hasil tersebut, ekstrak etanol daun kalangkala memiliki potensi sebagai agen antikoagulan alami.