Tanaman paku sepat (Nephrolepis cordifolia) merupakan tanaman yang memiliki khasiat sebagai antibakteri, antifungi, antikanker, dan hepatoprotektif. N. cordifolia diketahui mengandung metabolit sekunder berupa saponin, alkaloid, flavonoid, tanin, fenol, dan terpenoid yang memiliki pengaruh signifikan terhadap diabetes. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengevaluasi potensi penghambatan enzim α-amilase oleh ekstrak etanol serta fraksi n-heksana, etil asetat, dan n-butanol dari N. cordifolia menggunakan metode amilolisis kinetik yang dianalisis berdasarkan nilai GDRI. Penelitian ini menggunakan substrat berupa amilum 4%, 100 mg enzim α-amilase, kontrol positif akarbosa, dan 250 mg ekstrak dan fraksi N. cordifolia. Hasil penelitian menunjukkan bahwa fraksi etil asetat dari N. cordifolia memiliki efektivitas tertinggi dalam memperlambat pelepasan glukosa, dengan nilai GDRI masing-masing sebesar 81,562%; 79,084%; 76,685%; dan 72,947% pada menit ke-30, 60, 120, dan 180 diikuti oleh fraksi n-butanol dengan nilai 71,093%; 65,027%; 57,609%; dan 45,801%, kemudian ekstrak etanol sebesar 55,128%; 49,177%; 25,172%; dan 19,527%, serta fraksi n-heksana dengan nilai 40,609%; 20,801%; 10,015%; dan 2,979% pada waktu yang sama. Fraksi etil asetat menunjukkan aktivitas penghambatan enzim α-amilase yang paling signifikan dibandingkan sampel lainnya, dengan nilai signifikansi ≥ 0,05 terhadap acarbose.