Identifikasi forensik merupakan komponen fundamental dalam genetika forensik untuk penentuan identitas individu, khususnya pada kasus jenazah tanpa identitas atau peristiwa bencana massal. Analisis asam deoksiribonukleat (DNA) berbasis short tandem repeat (STR) menjadi pendekatan standar karena tingkat polimorfisme yang tinggi dan kemampuan diskriminatif yang unggul. Penelitian ini bertujuan mengetahui karakterisasi variasi genetik pada populasi Suku Banjar Hulu melalui evaluasi pola allele sharing pada tiga lokus STR, yaitu lokus D13S317, FGA, dan D1S1656, dalam konteks penerapannya pada identifikasi forensik. Penelitian menggunakan desain observasional deskriptif dengan rancangan cross sectional dengan memanfaatkan data sekunder dari 25 keluarga berjumlah 100 individu yang dianalisis menggunakan Capillary Electrophoresis Genetic Analyzer 3500 ABI dan perangkat lunak GeneMapper ID-X. Hasil penelitian menunjukkan adanya variasi genetik antar saudara kandung dengan nilai proporsi nol allele sharing tertinggi sebesar 36% pada lokus FGA dengan allele 11 sebagai distribusi data allele tertinggi, nilai proporsi satu allele sharing tertinggi sebesar 46% pada lokus D1S317 dengan allele 22 sebagai distribusi data allele tertinggi, dan nilai proporsi dua allele sharing sebesar 40% pada lokus D1S1656 dengan allele 15 sebagai distribusi data allele tertinggi. Karakterisasi ini menunjukkan kombinasi kekerabatan keluarga dan keragaman genetik dalam populasi Suku Banjar Hulu serta dapat menjadi bagian dari kontribusi identifikasi forensik.