Motivasi belajar berperan besar dalam keberhasilan siswa memahami materi pelajaran. Pada topik sistem sirkulasi manusia, motivasi masih rendah karena penyampaian materi umumnya bersifat konvensional. Observasi, wawancara dan angket kebutuhan siswa di SMA Negeri 4 Banjarmasin menunjukkan bahwa siswa merasa bosan dengan media ajar yang kurang bervariasi dan membutuhkan media yang lebih menarik serta mampu memvisualisasikan konsep sulit. Media Pop Up Book  berpotensi meningkatkan motivasi melalui visualisasi tiga dimensi yang menarik dan interaktif sehingga memudahkan pemahaman. Berdasarkan potensi tersebut, penelitian ini mengembangkan media Pop Up Book  untuk meningkatkan pemahaman dan motivasi belajar siswa. Penelitian menggunakan metode Research and Development (R&D) dengan model 4-D (Define, Design, Develop, dan Disseminate). Subjek penelitian meliputi 1 ahli materi, 2 ahli media, 1 guru biologi, dan siswa kelas XI SMA Negeri 4 Banjarmasin. Data dikumpulkan melalui lembar validasi dan angket untuk menilai kesesuaian, kelayakan, keterbacaan, respon guru dan siswa, serta efektivitas media. Jenis data dalam penelitian ini terdiri atas data kuantitatif dan kualitatif. Data kuantitatif dianalisis secara deskriptif, sedangkan masukan ahli dan responden dianalisis kualitatif untuk penyempurnaan produk. Hasil menunjukkan Pop Up Book  di kembangkan melalui tahap Define, Design, Develop, dan Disseminate, dengan penyebar luasan secara terbatas. Pop Up Book  memperoleh skor kesesuaian 4,56 (sangat sesuai), kelayakan 4,63 (sangat layak), keterbacaan 4,80 (sangat terbaca), respon guru 4,80 (sangat baik), dan respon siswa 4,63 (sangat baik). Nilai N-Gain sebesar 0,65 menunjukkan bahwa penggunaan Pop Up Book  dalam kategori sedang dalam meningkatkan motivasi belajar, sehingga dapat disimpulkan bahwa media Pop Up Book yang dikembangkan layak, sesuai, efektif, dan berpotensi menjadi alternatif media pembelajaran biologi dalam meningkatkan motivasi dan pemahaman 29 siswa kelas XI SMA Negeri 4 Banjarmasin pada materi sistem sirkulasi manusia.